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Affinity Biologicals的 抗體選擇

發(fā)布時(shí)間: 2024-03-20  點(diǎn)擊次數(shù): 1413次

 

出于價(jià)格和性能的原因,多克隆抗體通常是實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用的想到的試劑。Affinity Biologicals 提供廣泛的止血相關(guān)蛋白抗體系列。盡管 ABI 確實(shí)提供一些鼠單克隆抗體,但大多數(shù)抗體都是在綿羊和山羊中飼養(yǎng)的多克隆抗體。由于多克隆抗體含有針對抗原上多個(gè)識(shí)別位點(diǎn)(表位)的抗體,因此抗原-抗體相互作用的表觀親和力和親和力非常高。這導(dǎo)致更高的靈敏度,也意味著抗原在變性或蛋白水解加工后更有可能被識(shí)別。這些對于諸如 SDS-PAGE 等變性凝膠的免疫印跡以及固定細(xì)胞和組織的免疫組織化學(xué)等應(yīng)用來說是重要的考慮因素。多克隆抗體非常適合用于需要高靈敏度的免疫測定,并且通常是免疫沉淀技術(shù)和活性中和測定的想到的試劑。在 ABI,我們使用固定在樹脂上的多克隆抗體來特異性免疫消耗檸檬酸鹽血漿中的目標(biāo)蛋白,并從這些樹脂中回收目標(biāo)蛋白,并具有出色的活性恢復(fù),取得了巨大成功。

大多數(shù) Affinity Biologicals 抗體都有多種不同的形式,每種形式的精制程度各不相同。

  • 全I(xiàn)gG是基礎(chǔ)水平產(chǎn)品,是指使用多個(gè)沉淀和透析步驟從抗血清(通常是綿羊或山羊)中純化的IgG抗體。IgG 的純度通常為 90%,以含有 50% 甘油 (v/v) 的 HEPES 緩沖鹽水溶液形式提供。滴度基本上與起始抗血清相同,并且每個(gè)小瓶通常含有從一毫升抗血清中回收的 IgG 量。該級別的產(chǎn)品通常用于免疫沉淀、免疫電泳、免疫耗竭和活性中和測定等應(yīng)用。

  • 親和純化的 IgG是使用固定化抗原進(jìn)一步純化的抗體。親和純化是一種富集過程,其中整個(gè) IgG 通過共價(jià)連接有抗原的樹脂。在破壞抗原-抗體相互作用的條件下,非反應(yīng)性抗體被洗掉,特異性抗體被洗脫。結(jié)果是純度非常高的產(chǎn)品,滴度比全 IgG 高得多。該級別的產(chǎn)品適用于免疫印跡、細(xì)胞免疫染色和多種類型的免疫測定等應(yīng)用,這些應(yīng)用需要通過這種富集產(chǎn)品實(shí)現(xiàn)更高的信噪比。

  • 抗體偶聯(lián)物是完整的 IgG 或親和純化的 IgG,已與作為報(bào)告分子的辣根過氧化物酶、FITC 或生物素偶聯(lián)。這些產(chǎn)品適用于免疫測定、免疫印跡或流式細(xì)胞術(shù)等應(yīng)用。


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